Methoden und Analytik zum liposomalen Einschluss von D29-Mykobakteriophagen zur Tuberkulosetherapie

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Ziel dieser Arbeit war es, Mykobakteriophagen in ein liposomales Trägersystem einzuschließen. Mykobakteriophagen sind wirtsspezifische Viren, die Mykobakterium tuberculosis infizieren, das Tuberkulose verursacht. D29-Mykobakteriophagen wurden als Modellviren verwendet, da sie Mykobakterien durch Lysotypie bekämpfen. Makrophagen dienen als Wirt für die Mykobakterien, und um effektiv zu arbeiten, müssen die Phagen das Phagosom der Makrophagen unbeschadet erreichen. Es ist entscheidend, das menschliche Immunsystem zu umgehen, um die Bildung von Antikörpern gegen die Phagen zu verhindern. Daher wurde ein liposomales Trägersystem zur Behandlung von TB entwickelt, das die Einschlusskapazität und -effizienz für die D29-Mykobakteriophagen optimiert. Wichtige Einflussfaktoren sind das innere Volumen der Liposomen, die Lipidzusammensetzung, die Vesikelgröße sowie die Größe und Konzentration des verkapselnden Materials. Die Größe der D29-Mykobakteriophagen, über 200 nm, stellte eine Herausforderung dar. Verschiedene Methoden wie Elektroformation, Ethanolinjektion und Duale Asymmetrische Zentrifugation (DAC) wurden auf ihre Eignung zum Einschluss geprüft. Ein weiterer Schwerpunkt lag auf der Entwicklung geeigneter Analysemethoden, insbesondere Dichtegradientenzentrifugation und fluoreszenzmikroskopische Techniken, um den Einschluss der Phagen nachzuweisen. Die gleichzeitige Fluoreszenzmarkierung von Liposomen, viraler DNA und Phagenkapsid